ในการเพิ่มปริมาณการแสดงออกของยีนดี-ฟีนิลกลัยซีน อะมิโนทรานสเฟอเรสสามารถใช้เทคนิคทาง Molecular biologyโดยการโคลนเข้ากับ พลาสมิดเวคเตอร์ pET-17b และนำเข้าสู่เซลล์แบคทีเรีย Escherichia coli BL21(DE3) การทดลองในครั้งนี้ได้ทำการศึกษาการเหนี่ยวนำให้มีการสะสมของendogenous chaperones ภายในเซลล์ด้วยสาร benzyl alcohol หรือการเพิ่มระดับการทำงานของ molecular chaperones โดยวิธีการ co-expression ร่วมกับยีนของ molecular chaperones ได้แก่ DnaK-DnaJ-GrpE,GroEL-GroES และ trigger factor พบว่าปริมาณการแสดงออกของเอนไซม์อยู่ในรูปที่ทำงานได้ปกติแปรผันโดยตรงกับปริมาณของโปรตีน chaperone กลุ่มต่างๆ ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ Abstarct: D-Phenylglycine aminotransferase gene was expressed under strong inducible T7 promoter of pET-17b in E. coli BL21 (DE3). The overexpression of recombinant protein in E. coli often tends to misfold and accumulate as nonfunctional aggregate.First approach is to stimulate the formation of endogenous chaperones by addition of the membrane fluidizer heat shock–inducer benzyl alcohol (BA). Also another approach by co-expression of different sets of E.coli chaperone genes have shown beneficial effects to minimize the inclusion bodies formation during overexpression of D-phenylglycine aminotransferase including DnaK-DnaJ-GrpE, GroEL-GroES and trigger factor.
สถาบันส่งเสริมการสอนวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี (สสวท.) กระทรวงศึกษาธิการ เป็นหน่วยงานของรัฐที่ไม่แสวงหากำไร ได้จัดทำเว็บไซต์คลังความรู้ SciMath เพื่อส่งเสริมการสอนวิทยาศาสตร์ คณิตศาสตร์และเทคโนโลยีทุกระดับการศึกษา โดยเน้นการศึกษาขั้นพื้นฐานเป็นหลัก หากท่านพบว่ามีข้อมูลหรือเนื้อหาใด ๆ ที่ละเมิดทรัพย์สินทางปัญญาปรากฏอยู่ในเว็บไซต์ โปรดแจ้งให้ทราบเพื่อดำเนินการแก้ปัญหาดังกล่าวโดยเร็วที่สุด
The Institute for the Promotion of Teaching Science and Technology (IPST), Ministry of Education, a non-profit organization under the Thai government, developed SciMath as a website that provides educational resources in Science, Mathematics and Technology. IPST invites visitors to use its online resources for personal, educational and other non-commercial purpose. If there are any problems, please contact us immediately.
Copyright © 2018 SCIMATH :: คลังความรู้ SciMath. Terms and Conditions. Privacy. , All Rights Reserved.
อีเมล: This email address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it. (ให้บริการในวันและเวลาราชการเท่านั้น)